¶ 🧪 Буферный раствор Tris-HCl
¶ Синонимы
- Трис-буфер.
- Tris Hydrochloride buffer.
- Трис-хлорид.
- THAM (Трис-оксиметиламинометан).
¶ ⚠️ Безопасность и классификация исходного вещества
Вызывает раздражение кожи и глаз
Информация: Трис(гидроксиметил)аминометан является одним из самых популярных биологических буферов. Значение pH трисовых буферов сильно зависит от температуры (падает примерно на 0.03 единицы на каждый градус Цельсия при повышении температуры).
¶ 🧮 Интерактивный расчет навески
Задайте необходимый финальный объем, чтобы получить точные данные для взвешивания.
| Реактив | MW | Концентрация (M) | Объем (мл) | Навеска (г) |
|---|---|---|---|---|
| 157.60 | 0.0000 | |||
| HCl | — | — | Довести pH до 7.6 | |
| ddH2O | — | — | Довести объем до 100 мл | |
¶ 📝 Регламент приготовления
¶ Условия приготовления
- Температура: Важно измерять pH строго при температуре эксплуатации (обычно ). Если раствор будет использоваться при , его нужно калибровать именно при этой температуре.
Почему pH Tris-HCl зависит от температуры?
Из-за высокой энтальпии ионизации аминогрупп. При нагревании химическое равновесие смещается в сторону высвобождения протонов (), что снижает pH. Температурный коэффициент составляет примерно -0.031 ед. pH / °C.
Не понятно? Ну, смотри
У Триса одна аминогруппа (), которая в растворе превращается в катион (). При нагревании эти катионы охотнее отдают протоны в раствор. Чтобы оторвать от , нужно затратить энергию. При нагревании приток тепла извне смещает равновесие реакции вправо (согласно принципу Ле Шателье), облегчая разрыв этой связи и выброс протонов в раствор. Поэтому буфер с pH 8.0 измеренный при комнатной температуре в холодильнике (+4°C) станет щелочнее (pH 8.6), а в инкубаторе (+37°C) - кислее (pH 7.63).
- Метод: Растворение навески Tris-основания в деионизированной воде с последующим титрованием концентрированной соляной кислотой () до значения pH 7.6.
- Вытяжка: Требуется при работе с концентрированной (титрование).
- СИЗ:
- Маски: Респиратор P2 при работе с порошком Tris (сильный раздражитель дыхательных путей).
- Перчатки: Нитриловые.
- Очки: Защитные химические очки (обязательно при титровании кислотой).
¶ Условия стерилизации
- Автоклавирование: При в течение 15–20 минут.
- Важно: После автоклавирования pH может незначительно измениться, требуется проверка после остывания.
- Фильтрация: Стерилизующая фильтрация через мембрану 0.22 мкм (рекомендуется для высокоточных биохимических работ).
¶ Условия хранения и срок хранения
- Условия: Хранить в холодильнике () или при комнатной температуре. Буфер подвержен биообрастанию (росту плесени/бактерий).
- Срок хранения:
- Стерильный раствор: до 12 месяцев.
- Нестерильный раствор: не более 1–2 недель (рекомендуется обновлять чаще).
¶ ⚠️ Безопасность и классификация конечного вещества
При менее 0.1M
При более 0.5M
¶ Использованные источники
- Haynes, W. M. (2014). CRC Handbook of Chemistry and Physics. 95th Edition. CRC Press.
- IUPAC. Compendium of Chemical Terminology ("Gold Book"). Blackwell Scientific Publications, Oxford (1997).
- Lide, D. R. (2005). CRC Handbook of Chemistry and Physics. 86th Edition. Taylor & Francis Group.
- Harris, D. C. (2015). Quantitative Chemical Analysis. W. H. Freeman and Company.
- United Nations (2021). Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals (GHS). ST/SG/AC.10/30/Rev.9.
- NFPA (2022). NFPA 704: Standard System for the Identification of the Hazards of Materials for Emergency Response.
¶ Как цитировать
Sleptcov A. Genomicon Lab Recipes: Interactive Protocols and Safety Data for Laboratory Reagent Preparation (v1.1). Zenodo. 2026. DOI: 10.5281/zenodo.19759566. (Accessed: ).
