¶ Раствор ТЕ буфер
¶ 1. Синонимы раствора
- ТЕ-буфер, Трис-ЭДТА буферный раствор, Трисма-ЭДТА.
- TE buffer, Tris-EDTA buffer solution, T10E1 buffer.
ТЕ буфер — это стандартный базовый растворитель в молекулярной биологии. Он предназначен для растворения, защиты и стабильного долгосрочного хранения образцов ДНК и РНК. Трис-HCl поддерживает постоянный pH. EDTA связывает ионы двухвалентных металлов (), блокируя работу разрушающих нуклеиновые кислоты ферментов (нуклеаз).
¶ Безопасность исходных веществ
Стоковые жидкие растворы Трис и ЭДТА в указанных концентрациях вызывают слабое раздражение кожи и глаз.
¶ Рецептура и условия приготовления
| Компонент | IC | FC | 1X (на 100 мл) | 10X (на 10 мл) |
|---|---|---|---|---|
| 1 M Tris-HCl (pH 8.0) | 1 М | 10 mМ | 1 мл | 1 мл |
| 0.5 M EDTA (pH 8.0) | 0.5 М | 1 mМ | 200.0 мкл | 200.0 мкл |
| NFW | — | — | 98.8 мл | 8.8 мл |
| Целевой pH | — | 8.0 | — | — |
Примечание:
- IC - начальная концентрация исходного стокового раствора (initial concentration).
- FC - конечная рабочая концентрация в готовом буфере (final concentration).
- NFW - Nuclease-free water.
Для работы с РНК приготовьте специальный буфер. Используйте воду, обработанную DEPC, и скорректируйте конечный pH раствора до 7.5. При pH 8.0 РНК подвергается быстрому щелочному гидролизу.
Для стабильного хранения ДНК оптимальным является pH 8.0.
¶ Условия
- Температура: Приготовление проводится при комнатной температуре (20–25 °C).
- Вытяжка / СИЗ (Маски, перчатки, очки): Используйте стандартный лабораторный халат, нитриловые перчатки и защитные очки. При работе со стоковым раствором соляной кислоты обязательно используйте вытяжной шкаф.
¶ Условия стерилизации
- Стерилизующая фильтрация через мембрану с размером пор 0.22 мкм.
- Автоклавирование при 121 °C (15 psi) в течение 20 минут, ограничений для данного состава нет.
¶ Условия хранения и срок хранения
- Хранить при температуре от 2 до 8 °C или при комнатной температуре в стерильной пластиковой или стеклянной таре. Раствор не является светочувствительным. Срок хранения стерильного буфера составляет 12 месяцев. Для предотвращения контаминации рекомендуется разделять буфер на рабочие аликвоты.
¶ Безопасность конечной смеси
¶ Использованные источники
- Green, M. R., & Sambrook, J. (2012). Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 4th Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
- Sigma-Aldrich. Safety Data Sheet: TE buffer solution.
- Barker, K. (2005). At the Bench: A Laboratory Navigator. Updated Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
¶ Как цитировать
Sleptcov A. Genomicon Lab Recipes: Interactive Protocols and Safety Data for Laboratory Reagent Preparation (v1.1). Zenodo. 2026. DOI: 10.5281/zenodo.19759566. (Accessed: ).
