¶ 🧪 10X B-буфер (Basic-buffer, щелочной буфер)
Статус: Методика верифицирована
¶ Калькулятор состава
* Расчет производится автоматически при изменении объема
¶ B-буфер (на основе глицина, 10X)
Назначение:
Специализированный щелочной буфер, используемый в основном для ПЦР с высокопроцессивными полимеразами (proofreading) или при необходимости работы в более высоком диапазоне pH. Глицин в составе выступает в роли цвиттер-ионного буферного агента, который стабилизирует фермент и помогает эффективно денатурировать ДНК.
Ключевые отличия и преимущества:
- Высокий pH: Обычно имеет pH в диапазоне 9.0–9.5, что облегчает расхождение цепей ДНК на матрицах с высоким содержанием GC.
- Стабилизация фермента: Глицин предотвращает агрегацию полимеразы при высоких температурах цикла.
- Совместимость: Часто применяется в паре с Hot-Start полимеразами.
¶ Стерилизация
- Стерилизовать методом фильтрации через мембранный фильтр с размером пор 0.22 мкм.
- Использование автоклавирования не рекомендуется.
¶ Срок годности
- -20°C: 1.5 – 2 года
- +4°C: 4–5 месяцев
- +25°C (комнатная температура): не более 48 часов
¶ Как цитировать
Sleptcov A. Genomicon Lab Recipes: Interactive Protocols and Safety Data for Laboratory Reagent Preparation (v1.1). Zenodo. 2026. DOI: 10.5281/zenodo.19759566. (Accessed: ).
